体外诊断试剂稳定性评价

      作者单位：卫生部北京医院 卫生部临床检验中心

      有关体外诊断试剂，厂商和实验室人员关注更多的是其分析性能中的偏倚和不精密度，并对这两个因素建立了很多要求方案。但因为稳定性不是一个可以直接测量的特性，所以有关体外诊断试剂不稳定性评价的文件很少见。为了帮助大家对体外诊断试剂不稳定性评价有更好、更全面、更系统的了解与学习，本期特别邀请了卫生部临床检验中心王治国教授就体外诊断试剂稳定性评价的问题做了综合、详细的介绍，主要包括稳定性测试过程概述、实施稳定性研究方案、被测量漂移作为稳定性度量的示例和加速稳定性测试的相关内容。

　　偏倚、不精密度和稳定性是大多数体外诊断试剂分析性能的基本要素，在这些属性中偏倚和不精密度已经得到厂商和实验室人员的充分理解，也有许多建立要求的方案得到广泛的承认。

　　但是对于稳定性的评价相似的文件却很少。这很大一部分原因是因为尽管稳定性被认为是一个产品保持稳定组分、属性和性能的能力但却不是一个可以直接测量的特性。因此，一个产品的稳定性要求只能依靠厂商随着时间推移对特定产品属性进行评价而得出。使用者也只能从产品的使用说明书中获得产品的稳定性要求并仅仅通过长期的质量控制或是类似的数据在实验室中进行直接的验证。

　　美国食品和药品监督管理局（FDA）要求体外诊断试剂厂商要将稳定性信息作为产品标签的一部分，但是没有建立这种要求的直接指南，厂商只能依据药物和药品的规章信息建立稳定性要求。

　　2002年，欧洲标准化委员会发表了体外诊断试剂稳定性检测需要的协商一致的标准，该标准文件EN13640结合了制药指南文件，在术语、体外诊断试剂稳定性要求的类型和建立要求的需求方面提供了高水准的信息；最近的美国临床和实验室标准化研究院（CLSI）发布指南性文件EP25-A：体外诊断试剂稳定性评价，该文件提供了确定和检测体外诊断试剂的使用效期和保存期所需要的关于设计、执行、数据分析和研究所需的文件资料，这为体外诊断试剂稳定性评价的标准化提供了指南。

　　一、稳定性测试过程概述

　　建立产品稳定性要求需要遵循以下四步：提供一个给定产品稳定性的实用性的定义；拟定一个稳定性测试计划以产生实验数据；执行计划；通过分析实验数据导出和文件记录稳定性要求。

　　1. 稳定性定义

　　随着时间推移通过检测所有产品的属性建立稳定性要求是可行的，但由于工作量的巨大在大多数实践中是不可能实现的，一个更实际的方法是仅检测关键的属性。

　　以下的三个关键因素是这个稳定性定义的本质：什么样的产品度量标准被认为是关键的性能指标；对每一度量标准所允许的多大的变化（可接受准则）；在结果的分析上所期望的置信度和分析功效。

　　所有关键的产品度量标准在给定的统计置信度内满足各自的接受标准的时间间隔定义为产品的稳定性持续时间。由于这三个因素中的每一种可能是产品所特有的，提供一个适合所有体外诊断试剂的单一的试验设计方案是不切实际的。

　　（1）稳定性度量

　　进行稳定性定义的第一步就要求厂商选择度量指标最能揭示一个产品在保存期内质量、安全或功效发生潜在的重大的变化。这些度量指标可能会反应产品本身的物理的、生物的、化学的或微生物的特性或者产品使用中的分析特性。前者包括颜色、pH值、颗粒大小、沉淀物的出现、生物负荷、特性和纯度。后者包括被测量漂移、检出限、选择分析物浓度方法的精密度、回收率和干扰物的偏倚。这些度量的适当选择可以进行适合于定性和定量的体外诊断试剂的稳定性定义。

　　被测量漂移是定量的体外诊断试剂稳定性评估的一项传统的度量指标。它直接反应了在特定条件下（例如：时间、温度）一个校准品或质控品被测量含量的改变或一个产品量化样本中被测量的能力。这种改变可以用绝对偏差或相对偏差表示。

　　（2）可接受标准

　　关键度量指标的可接受标准可来源于产品设计输入要求特别是其预期用途、方法已建立的质量目标、相似产品的历史数据、现有产品的典型性能。多数产品稳定性研究使用多个测试样本为的是在整改方法的分析测量范围内评估性能。在这些情况下，任何一个样本的最小稳定性区间最后成为这个产品批号的整体稳定性区间。

　　2. 稳定性研究的类型

　　保存期研究用于确定体外诊断试剂在规定的保存条件下在最终包装内的效期，这代表了一个产品无论是否使用在要求的条件下保存，从出厂到可用的最后一天的时期。稳定性研究的类型一般分为储存期稳定性研究、使用期稳定性研究及运输模拟研究。CLSI EP25-A指南文件要求使用3批产品建立储存期要求。

　　相反的，使用期要求是产品投入使用后产品保持活性的时间段，这种实例有：质控品开盖后的使用期及一个方法在需要进行再校准之前的使用期